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질문 H&E 염색시 왜 핵이 까맣게 염색이 될까요
올챙이아이브릭(대학생)  |  2019.11.25 10:28

 

안녕하세요,

현재 생쥐 thyroid를 bouin's solution으로 고정하고 section하여

H&E 염색을 진행하였습니다.

 

그런데 아래 사진들과 같이 (200배, 400배) 핵 부분이 까맣게 염색이 되어요.

이게 전부터도 까맣게 되던데, xylene에서 EtOH 100%로 넘어갈 때 좀 더 잘 털어줘도 보고, 시간을 오래도 둬보고 용액을 바꿔도 줘 봤는데도 이러더라구요..

혹시 어떤 단계에서 잘못되면 아래와 같이 핵이 까맣게 염색이 되는지 알 수 있을까요?

 

upload_image

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#H&E staining
 
#염색
 
#immunohistochemistry
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개구리명품남자  |  2019.11.25   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

연한색상(보라색)으로 상당수 핵은 hematoxylin 염색이 잘 되었습니다.

hematoxylin solution이 컨탐이 되었거나 section시 두껍게 밀리거나 한 듯한 느낌이네요.. destaining을 한번 해보는게 어떨까 싶기도 하네요...

올챙이아이브릭  |  2019.11.25   

답변 감사합니다.

section은 5um으로 하였고,

staining은 IHC를 진행하여 DAB 등의 염색을 진행할 때에도 까맣게? 나오더라구요.. 약간 기포들이 머금은 느낌이라고 해야하나요. 이런 경우 section의 문제일까요? 아니면 embedding 과정에서의 문제인지 알 수 있을까요?

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