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 전체 > Chemical biology > Analysis
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질문 MTT나 DPPH assay의 과정에대해 딜레마에 빠졌습니다..
올챙이RBR(대학생)  |  2019.11.17 17:25

MTT 실험 진행 후 결과를 확인했을 때 농도별로 모두 Formazan의 통계적으로 동일한 흡광도를 확인하였습니다 (ns) 1600ppm의 농도까지 treat 하였고 후에 24h동안 배양시켰습니다...

혹시 몰라서 well plate를 보관중이었는데.. 2일이 지난 후 보니 농도별로 비례하여 색이 달라졌더라구요.. 이러면 프로토콜대로 진행하였을 때 이 물질이 세포 독성이 1600ppm 이하에서는 독성이 없다고 해야할 지 아니면 늦게나마 나타났으니 IC50을 구해야할지 모르겠습니다..

비색분석법들은 모두 이런 혼돈에 빠져있습니다..

비슷한 예로 sharma and bhat(2009) 논문 protocol 대로 DPPH assay를 진행하여도 흡광도의 차이가 없다가 반응 시간을 30분에서 3배 - 4배로 늘리면 농도별 흡광도 차이가 나타나는 경우가 있는데 이는 항산화 활성이 있다고 하여야할지 궁금합니다..

 

두서없고 기초적인 질문드려 죄송합니다..

 

#MTT
 
#DPPH
 
#absorbance
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2019.11.17   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

시간이 지나서 색깔이 변하는 것은 결과값으로 취하면 안됩니다.

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