실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
uncut vector와 cut vecter 차이 관련해서 질문 드립니다ㅠ
레벨2 pico (일반인)
안녕하세요
랩실에서 실험을 배우고 있는 학부생입니다.
다름아니라 제가 cloning을 진행중인데요
ligation을 위해 vector를 enzyme reacion해서 agarose gel에 전기영동을 했는데
이론상으로 uncut vector가 더 아래로, cut vector가 위로 나와야 한다고 알고있는데
계속 uncut vector가 사진처럼 훨씬 위쪽에 나와서 다음 실험을 진행하지 못하고 있습니다 ㅠ
처음에 사용했던 uncut vector가 혹시 보관 과정에서 잘렸나싶어서 새로 mini-prep한 DNA로 해봤는데도 계속 저렇게 나오네요 ㅠㅠ
찾아보니 2% gel에서 해야 uncut vector가 아래로 내려간다는 글을 봐서 그렇게 내렸는데도 여전히 uncut vector가 위에 나오네요 ㅠㅠ 물론 1%도 마찬가지였습니다 ㅠㅠ
vector 종류는 pcDNA3.1(+)입니다!
순서대로 1kb M, uncut, EcoR1 onecut, Xho1 onecut, Eco/Xho two cut 입니다
왜 이런결과가 나오는지 알려주시면 정말 감사하겠습니다 ㅠㅠㅠ
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