실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
96-well에 loading시 bubble이 안 생기게 하는 팁이 있나요
레벨1 VanillaLatte (대학원생)
* 질문요약하면,
1) 96well plate에 생긴 bubble을 제거하는방법
2) loading 시 거품이 생기지 않게하는 팁
이 궁금합니다
안녕하세요
툭 터놓고 조언구할 직속선배, 사수도 없고, 랩에 속한 연구교수님이 계시긴 하지만 어렵기도 하고... 이런 사소한거 여쭤보면 별로 안좋아하셔서....
이렇게 경험에서 우러나오는 사소한 팁을 얻기 힘들어 여기 계신 선생님들께 질문드립니다.
96-well 을 포함해 pipette으로 loading 시 거품(bubble)이 안 생기게 하는 팁이 있나요?
이 질문은 real-time PCR 하며 생긴 고민인데, 이 외 다른실험에도 거품이 안생기게 loading하고 싶습니다.
제가 해본 방법과 결과로는
1. sealing 후 살살 탁탁 내려치기 → 표면에 생긴 큰 bubble은 안 없어짐
2. sealing 후 손가락으로 꿀밤때리듯 치기 → 큰 bubble들이 쪼개지긴 한데 없어지진 않을때도 있음
3. sealing 후 뒤집어서 내려치기→ bubble이 표면에 생기길래 뒤집어서 쳐봤는데.. sample이 넘쳐 버린것같아서 그뒤로 안쓰는 방법ㅠㅠ
4. centrifuge (500g, 3분) → 표면의 큰 bubble은 안 없어질때도 있음
입니다.
위 방법으로 어느정도 없어지기도 하지만, 그래도 더 완벽히 없애고 싶은데 잘 안되네요..
찾아보니
살살살 바닥에 치면된다, 꿀밤치듯 때려라, 헤어드라이어로 데워라(researchgate 글), 달군 바늘로 찔러라, centrifuge해라 가 있던데
이 밖에도 다른 방법이 있을까요?
아님 제 pipetting에 문제가 있는걸까요?
저는 tube 벽에대고 천천히 eject 한다고 하는데, 마지막에 2단계까지 눌러서 다 내보내려 하다보니 거품이 생기는것 같습니다. 하지만 또 어떨때는 매끈하게 흘러 쌓이기도 하구요. 어떤 차이인지 잘 모르겠습니다..
그래서 질문을 요약하면,
1. 96-well 에 생긴 bubble을 제거하는 방법이
바닥에 탁탁 내려치기, 손가락으로 꿀밤치듯 치기, centrifuge 이외에도 다른 팁이 있나요?
(헤어드라이어랑 달군 바늘 방법은 저희 랩에서 하기 어려울것같아서 제외하겠습니다..)
2. 선생님들께서는 loading할 때 거품이 생기지 않게하는 특별한 팁이 있나요?
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