실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
IMAC 정제시 다른 단백질도 같이 정제가 됩니다 ㅠ_ㅠ
레벨4 졸업은언제하나 (대학원생)
안녕하세요!
정말..제가 너무 자주 질문하러 오는데..너무 부끄럽습니다 ㅠ_ㅠ
Bl21(DE3)에서 발현한 펩타이드를 (10 kD) IMAC정제를 진행했습니다.
첨부한 이미지대로 워싱하고, elution을 진행했는데요..
왜..6 kD 부근에 비슷한 두께의 펩타이드가 보일까요 ㅠ_ㅠ
저희 이 샘플을 N-term 시퀀싱과 CD, MS 분석을 진행해야하는데..
두께도 진하고...ㅜ_ㅜ....
6 kD와 10 kD차이인데 SEC으로 분리는 힘들겠죠?
이런 경우에는 어떻게 분리해야 할까요...
학위과정중에 처음 클로닝·발현·정제해보는데..
온갖 고난과 역경을 다 여기서 물어보고 가는 것 같아서 참 부끄럽습니다 ㅠ_ㅠ
감사합니다.
감기 조심하세요!
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