실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > etc.
bradford assay 의 실험자 간의 오차는 어디까지일까요?
레벨5 클레엉 (대학원생)
안녕하세요? bradford assay 에 대해 궁금한 것이 있어서 질문글을 남겨봅니다.
저희 연구실에서는 protein 정량시 bradford를 이용해 하고 있습니다. 저희 연구실에서 정제하여 사용하는 단백질이 있는데, 해당 단백질을 정제 후 사용할 만큼 aliquot 해서 두는데, 해당 단백질의 bradford assay 가 사람마다 굉장히 다르게 나오는 것을 보았습니다.
다른 친구 손에서는 정량 시 1.1ug/ul 이 나오는 것이 제 손에서는 2.2ug/ul 씩 나오고 있습니다. 해당 단백질을 정량 시 저 말고도 다른 사람이 했을 떄 약 1.8ug/ul 정도가 나오더라구요. 제가 그린 standard graph 는 R^2=0.998 이었고, duplicate으로 진행하였으며, 다른 친구들이 그린 standard 도 못해도 R^2 값이 0.995 정도는 나왔습니다. 그냥 단백질이 균일하게 섞이지 않았던 것일까요? 그렇다 하더라도 같이 정제된 단백질이 이 정도로 차이가 날 수 있나요?
Bio마켓 프리미엄