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 전체 > Cell Biology > Transfection
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질문 GFP Vector 사용이유
알a4049b(대학생)  | 2019.11.10 22:42
논문을 읽다가 궁금한점이 생겨 질문드립니다
Transfection하는데 overexpression 하고자 하는 유전자(A라 하겠습니다)를 확인하는 figure입니다.
그런데 여기서 mock/GFP/A 이렇게 3개의 비교대상을 한 그래프에 나타내고 있습니다...
갑자기 GFP가 나오는데 GFP 벡터를 뜻하는것 같은데 왜 갑자기 GFP를 사용을 하나요..? 굳이 mock도 있는데 이 GFP를 사용하는 이유가 있을까요...?
#MTTassay
 
#Transfection
 
#GFP
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리강시  |  2019.11.11   

GFP는 보통 reporter라고 하죠.

이 단백질은 초록생 형광을 만들기 때문에 이 단백질이 발현량에 따라서 형광이 강해집니다.

이 GFP 단백질 앞에 또는 뒤에 내 단백질 유전자를 퓨전시키면 내 단백질의 발현이 많이 되었는지 적게 되었는지 정량할 수 있습니다. 

개구리무광  |  2019.11.13   

강시님이 말하는 경우는

원하는 protein의 발현여부를 확인하기 위해 Reporter로서
Target protein과 GFP fusion을 발현시켰거나
Target protein과 GFP를 같이 발현시키는 vector을 이용했을 경우 (P2A, IRES 등) 입니다

이 경우 말고
GFP는 별 다른 생물적 기능이 없고 형광을 내는 단백질이기 때문에 
(물론 경우에 따라 GFP를 비롯해 단백질의 Overexpression 자체가
영향을 미칠 수 있다는 보고도 꽤 있습니다)

같은 vector에 GFP발현벡터, 원하는 protein 벡터를 만든 뒤
GFP벡터를 control로 이용하기도 합니다. 

즉 원하는 Protein을 Overexpression을 시켜서 생겨난 결과가
단순히 아무런 Protein을 Overexpression시켜서 생겨난 결과가 아니다라는 
걸 입증하는 Control로 사용하는 것입니다

Mock과 GFP+의 결과가 같고, A의 Overexpression만이 결과가 다르다면
A의 Overexpression에 의한 결과라는 걸 더욱 입증시켜주는 셈입니다.

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