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레벨2
하춘화마타타
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19.11.11 10:36
음.. 일단 먼저 말씀드리자면, cell을 바로 액체질소에 동결하면 cell 손상이 되는 것은 사실입니다.
하지만 vial에 소분한 후 냉동실에서 약 30분동안 둔 후 동결한 것이 운이 좋다면 cell에 손상이 안됐고 잘 동결 되었을 것이고 아닌 경우에는 cell을 다시 소분하여 냉동하셔야 겠네요.
FBS 20% 성분으로 cell의 손상을 완벽하게 막을 수 있다고 보는 건 저는 좀 어렵다고 봅니다..
동결시켰던 stock을 다시 풀어 보세요...
또 stock에서 세포 생존율이 없다면 재 동결을 해야겠죠...
현 상황에서는 어찌 도리가 없네요...
셀 동결을 할때 freezing tank라는 제품들이 있습니다. 이런 제품을 이용하시면 생존율을 높일수 있습니다.
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레벨5
지나가는사람
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19.11.11 14:43
솔직하게 말씀드리면,
원래 원칙상 딥프리저에 먼저 보관한 뒤,
액질에다가 옮겨야 하는 것이 맞습니다.
하지만, 제가 한번 실험을 해 보았습니다.
하나의 cells 을 2 vials 로 나눠 하나는 바로 LN2에 넣고, 하나는 기존 방식대로
-70 도씨에 얼려 LN2로 옮겨 봤을때,
세포 생존에 따라 비교해봤을 경우 그렇게 많이 차이는 나지 않았습니다.
제가 얼린 cells 은 T cells 입니다.
너무 걱정 안해셔도 될 듯 합니다.
다만, 너무 급하지 않은 이상,
원래 하던 방식대로 하시길 권장합니다.
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레벨5
지나가는사람
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19.11.11 14:45
그리고, 세포 동결시
아래 제품을 사용합니다.
너무 고가이긴 하나, 일반 media에 dmso를 넣어 얼리는 것 보단 확실히 더 좋습니다.
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레벨3
hcp074
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19.11.13 10:31
오히려 냉동 상태로 오래 두는 것이 안 좋습니다.
냉동 상태로 일주일 이상 두면, cell viability가 많이 떨어집니다.