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질문 GSH assay 중 masking
알wj218(대학생)  |  2019.11.09 00:41

GSH assay 중에  GSSG 만의 농도를 알기위해 masking 시약으로 1methyl-2-vinylpyridinium trifluoromethanesulfonate1 (M2VP)를 사용했습니다.

 

masking 시약 넣고, 샘플을 넣어주면

GSH는 SH기가 masking되어 불활성화 되어 샘플 내에 있는

GSSG만을 선택적으로 측정하는 것으로 알고있는데요.

 

이때 최종적으로 남아있는 GSSG가 GR에 의해 GSH로 환원되어 이 GSH와 DTNB의 반응으로 처음 샘플내에 있는 GSSG 만의 농도를 알수있는 것 까지 이해했습니다.

 

근데 GSSG가 GSH로 환원되면 초반에 넣어준 masking 시약과는 반응하지않나요??

제거하는 단계가 따로있을까요

 

#GSH
 
#M2VP
 
#masking
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
뒷다리hcp074  |  2019.11.13   

말씀하신대로 저도 궁금하네요.

protocol을 자세히 보니, M2VP 처리 후, Metaphosphoric Acid (MPA)를 첨가하여, 여기에 녹아 나오는 물질만 이후 정량 실험에 사용하는 것으로 되어 있던데요.. 혹시 M2VP가 MPA에 녹는 성질이 있을지요?

녹지 않으면 MPA 처리에 의해 침전되어, cfg 할 때 pellet으로 가라 앉아 제거될 수도 있을것 같습니다.

또다른 가능성으로는 M2VP가 MPA 존재 하에는 thiol기 blocking 작용을 못하는 것은 아닐지요..

재밌는 질문인데, 저도 답이 궁금하네요~

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