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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
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질문 Western blot 후 Chemidoc으로 찍은 이미지에서 marker를 표시하는 방법
뒷다리에우로파(대학원생)  |  11.07 19:48

Western blot 후 Chemidoc으로 찍은 이미지에서 marker를 표시하는 방법이 궁금해요

여태까지는 chemidoc으로 사진 찍은 후에, membrane을 꺼내서 마커를 보면서 사진과 비교하여 확인했고, 사실 Figure만들때도 얇게 잘라서 만들다보니, 궁금한 부분이었지만 그냥 넘어갔엇거든요

구글을 뒤져보니 다음과같은 방법들이나오는데

1. Western marker를 사용한다--> HRP가 달려있거나, IgG 가 달려있는 단백질이 사이즈별로 섞인 marker를 팔더라구요. 이것도 방법일것 같고

2. Western blot pen을 사용한다 --> Luminol pen이란 이름으로 국산제품도 있고 하던데, 이제품은 membrane으로 blotting된 SDS-PAGE용 마커에 펜으로 덧칠해주면 chemidoc으로 사진찍을때 같이 찍히는 원리더라구요. 이것도 괜찮고

3. 혹시 다른 좋은 방법은 없을까요? 특히 chemidoc program을 통해서 마커부분과 merge를 할수 있다던지.(이부분은 제가 chemidoc biorad꺼 프로그램을 좀 만져봤지만 아직 찾지 못했어요)

 

혹시 아시는분 계시면 답변 감사하겠습니다

#Western blot
 
#marker
 
#size marker
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케미닥에서 필름만 따로 찍는 방법이 있습니다. 저도 biorad꺼 쓰는데 custom 들어가면 film이라는 부분이있을거에요. 그걸로 찍으면 멤브레인 사진 찍힙니다. 그냥 멤브레인 찍을때랑 band찍을때랑 찍히는 사이즈, 겔 종류 같도록 설정하셔야합니다
앞다리아이스티  |  11.08 11:48  

Bio rad 제품이면 프로그램 왼쪽에 보시면 위쪽에

image tool 에 들어가보시면 맨아래 merge 가능하고요

custom 으로 membrane을 찍어서 marker 보이게 하고 

blotting 한 결과와 merge 하면 됩니다.

단 두 사진을 찍을때 size 조건을 같게 해야 

merge 했을때 완벽하게 겹치게 됩니다.

알혁진  |  11.08 17:33  
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