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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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질문 cell culture 및 sample treat 할 때의 미디어 양 질문입니다.
앞다리n_jyoung92@naver.com(대학원생)  |  2019.11.01 21:46

계대배양을 위해 cell culture 할 때와 sample 을 미디어에 녹여 treat 할 때의 미디어양이 적당한지 봐주셨으면 합니다...

100 mm : culture 10 mL, treat 5 mL

60 mm : culture 4 mL, treat 2 mL

6 well plate : culture 2 mL, treat 1 mL

24 well plate : culture 500 uL, treat 250 uL

위와 같은 volume으로 여태껏 실험을 해왔는데요. 문득 이게 적당한건지, 다른 선배님들은 어느정도로 진행하시는지가 궁금합니다.

따로 cell을 계수하여 진행하지는 않습니다.. 혹시 cell을 계수해서 culture 하는 것은 어떻게 하는건가요..?

 

#cell culture
 
#media
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
cshin0417@gmail.com  |  2019.11.03    
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

100 mm : culture 10 mL, treat 5 mL

total volume 10mL/1 dish

 

6 well plate : culture 2 mL, treat 1 mL

total volume 2mL/1well

제가 썼던 케이스는 위와 같았습니다. 

일반적인 경우보다 좀 많은 편 아닐까요?

개구리지나가는사람  |  2019.11.03   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

100 mm : total 10 ml / dish

60 mm : total 5 mL / dish

6 well plate : total 2 mL / dish

24 well plate : total 500 ul / dish

96 well plate : total 200 ul / dish

저는 위와같이 진행합니다

모든 세포의 경우, culture 전에 cell counting을 진행한 후 dish에 맞춰 적당량의 cells 을 사용해야합니다.

보통은 hemocytometer를 사용하여 합니다.

 

부착 세포의 경우, dish에 80% 정도 찼을경우 이를 3분의 1로 나눠 다시 culture를 합니다.

 

예를 들면, 100cm dish에 진행한다할경우 

대략 10ml / 80% cells 이 있다면 이를 떼어네어 3ml + media 7 ml 을 추가하여 100cm dish에 다시 sulture 진행합니다. 

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