실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > etc.
Ni-NTA sensor chip 표면 blocking agent 문의드립니다.
레벨4 졸업은언제하나 (대학원생)
안녕하세요:D
SPR 분석 실험 준비중인데 궁금한 점이 있어서 질문드리러 왔습니다.
Biacore 장비를 사용할 예정이며, sensor chip은 NTA chip을 사용할 예정입니다.
실험 방법은 다음과 같이 준비 중입니다.
1. NTA chip위에 Ni activation 시킴.
2. 6xhis tag 단백질 (~10 kDa)를 리간드로 고정시킴.
3. Blocking agent 로 남은 Ni-NTA잔기 blocking.
4. Analyte 흘려서 분석 진행.
논문이나 메뉴얼지 등을 찾아보아도
Ni-NTA chip 위에 6xHis tag단백질을 고정한 후에 다른 blocking agent 없이 (혹은 BSA 같은 것을 사용) 바로 analyte를 인젝션하던데..
저희 analye의 경우는 analyte에도 6xHis가 붙어있습니다.
그래서 analyte를 넣기 전에 poly His tag으로 blocking을 하고싶은데,
시그마에 검색해보니 L-polyhistidine (wt 5,000-25,000)과 L-histidine으로 나누어서 판매중입니다.
두 제품 중 어느것이 더 적합한지 판단을 못 하겠어서 문의 드립니다 ㅠㅠ
아니면, 비슷한 실험을 진행하셨던 분이 계시면 조언을 부탁드립니다.
감사합니다!
Bio마켓 프리미엄