실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Transformation
cloning 후 transformation 잘 안됩니다
레벨5 시은 (대학원생)
사용한 벡터는 Pet21a 이고 원래 가지고 있던 plasmid는 A와 B유전자가 붙어있는 상태고 A는 목적하는 단백질이고 B는 세포투과성단백질입니다.
그래서 최근에 cloning을 진행하여 AB대신 C를 , A대신 C를 삽입하여 C와 C+B의 plasmid를 제작했습니다.
그런데 원래 가지고 있던 AB는 문제없이 Dh5ad와 BL21에 TF가 되고, C도 마찬가지로 문제가 없는데 CB가 Dh5a에는 잘되지만 BL21에서만 콜로니가 하나 두개 만 뜨는 정도 입니다.
사용하는 comcell과 배지, 이외에도다른 조건들에서 변수가 없는데 오직 저 CB만 TF의 효율이 매우 낮습니다..
혹시 이런 경험 있으신분 계신가요..?
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