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질문 geneall plasmid kit 쓰시는 분 계신가요?
알CUU(대학원생)  |  2019.10.19 17:24
고 농도의 plasmid가 필요한데 geneall의 plasmid mini prep kit를 사용중입니다. 3-40ng/ul 정도의 농도가 나오는데 더 높일 수 있는 방법 없을까요? cell 양은 10mL 24hr 정도 배양 해봤는데도 농도가 저정도 나오네요...
#mini prep
 
#plasmid
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2019.10.19   

Plasmid 이름이 뭔가요?

high copy plasmid인지 아니지가 plasmid 양에 영향을 미치고 prep.방법도

문제가 있으면 개선을 하는 것이 좋습니다.

알CUU  |  2019.10.20   
pRS42K라는 플라스미드 벡터를 prep중입니다. 다른 분들은 성공예가 있기 때문에 prep 방법에 문제가 있다고 여겨지는데 주로 어디에서 문제가 생기면 농도가 낮게 되는지 모르겠습니다.
대왕개구리SPEED  |  2019.10.20   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

pRS42K는 shuttle vector로 대장균 내에서 high copy number입니다.

따라서 plasmid prep. 방법을 한번 재 검토 해보는 것이 좋을 듯 합니다.

kit를 사용하면 protocol은 모든 사람이 동일하게 하지만 개인적인 실험 skill

차이에 의해 수율이 달라지기 때문에 실제 실험 방법을 모르고서는 어느 부분을

개선해야 할지 알기가 어렵습니다.

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