실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > etc.
단백질 보정에 대한 질문입니다.
레벨5 감사합니다! (대학생)
cell에서 elastase activity를 보기 위해서 substrate와 반응시킨 후 흡광도를 측정했습니다. 미리 BCA를 통해 각 샘플의 단백질 농도는 알아 놓은 상태인데요.
계산하는 부분에서 막혔습니다...우선 kit를 사용한 것이 아니라 계산법이 없고, 프로토콜에서도 계산법이 따로 없습니다..cell에서 enzyme extraction 하여 elastase inhibition을 본 논문들을 봐도 글 말미에 단백질 보정을 했다고만 나오고 다른 계산법은 안 나옵니다..
units/mg protein 으로 나타내야 할 것이기 때문에 units/ml 나누기 mg protein/ml 인 듯 한데 분자는 BCA로 아는데, 분모를 어떻게 알아내야 할까요..
enzyme을 따로 사용한 게 아니라 미디어에서 얻은 거라 Unit을 어떻게 적용시켜야 할지도 모르겠습니다.
간단하게 생각해서 sample Abs-control Abs/control Abs *100을 하게되면 activity는 나오지만 단백질 보정을 못하고 흡광도를 무작정 단백질 농도로 나누는 건 당연히 아닌 것 같고...
이런 효소반응은 계산을 어떻게 하는지 궁금합니다.
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