[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-RNA > Purification/Isolation
조회 2827  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 잎 RNA 추출 질문드립니다ㅠㅠ
올챙이닉네임0115(대학원생)  | 2019.10.17 17:51

안녕하세요! 저는 딸기 잎으로 실험하려고 하는 대학원생입니다..

딸기 잎에서 RNA를 추출하고 있는데요, kit를 이용해 추출하고 있는데 잘 되지 않아 질문드립니다.

1학기 때 딸기 잎 지금 시료보다 약간 어린 잎으로 RNA 잘 추출했었는데요, 지금 하려니까 잘 안되어서 이게 실험 과정에서의 문제인지, 아니면 잎에서 RNA를 추출할 때는 다른 과정(과실 등보다는 fiber나 그런 것들이 많으니까요..?)이 더 필요해서 그런 것인지 도움 요청드립니다ㅠㅠ

추출은 Qiagen 사의 Rneasy plant mini kit를 사용하고 있고 protocol과 똑같이도 해보고 RLT buffer incubation 시간도 늘려보고 하였는데 추출이 되지 않습니다.ㅠ

nano drop으로는 20~70ng 정도라고 잡히는데 전기영동에서는 검게만 보이고 아예 안 보이는 것으로 보아 아예 추출이 안 된 것 같아요ㅠㅠ

혹시 비슷한 경험 있으신 분 미리 답변 감사드립니다!

#RNA 추출
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2019.10.17   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

갖아 중요한 단계는 식물 조직을 잘 grind를 해야 합니다.

그 다음 RLT를 넣고 5분 정도만 incubation 후 강하게 vortex를 해야지 추출 수율이

올라갑니다.

올챙이닉네임0115  |  2019.10.18   

답변 감사합니다! 조금 더 신중을 기해서 다시 해보아야 겠어요ㅠㅠ

그런데 RLT를 넣고 vortexing을 하고 incubation을 하나요 아니면 incubation을 하고 vortexing을 하나요?

대왕개구리SPEED  |  2019.10.18   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

incubation, 5min -> 강한 vortex 또는 2번 반복하면 됩니다.

강하게 vortex할 수록 RNA 추출에 좋습니다.

올챙이닉네임0115  |  2019.10.18   

정말 감사합니다!

개구리지나가는사람  |  2019.10.23   

방법 하나 알려드리겠습니다.

 

1. 액체질소에 딸기 잎을 동결한다.

2. 막자와 막자사발로 잎을 갈아준다.
   - 갈아주는 동시에 액체질소를 계속 보충 (액체질소가 있는 상태에서 갈아줌)
   - 가장 중요한 것은, 완전히 고운 분말이 될때까지 충분히 갈아주셔야됩니다.

3. 분말처럼 갈린다음, 액체질소를 조금 보충 후, Trizol 및 Easy blue 등 RNA 추출 용액을 1ml 을 넣습니다.

4. 1ml 을 넣으면 사탕 처럼 굳습니다(얼음), 그상태에서 한번 더 파우더처럼 계속 갈아줍니다. Trizol 첨가 후부터는 액체질소 첨가 하지 않습니다.

5. 그리고, 계속 갈아주다보면, 다음과 같은 상태 변화가 일어납니다.

   파우더 --> 녹은아이스크림처럼 액체화 --> 액체

6. 액체가 되면 E.tube에 옮겨 다음 스텝으로 진행하세요~

 

잎사귀 뿐만아니라 조직에서도 이와같은 방법으로 RNA 뽑는 것이 가능합니다.

 

답변하기
할인행사 광고 검색광고
다온비에스 다온비에스
[DNAGenotek] Oragene Collection kit 무료샘플 사용해보세요!! (7.31까지)
다온비에스 다온비에스
[DNAGenotek] Omnigene·GUT Collection Kit 무료샘플 사용해보세요!! (7.31까지)
브래디 브래디
초저온라벨 등 실험실용 풀칼라프린터 (COVID-19 안전사인 지원) (8.30까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
High Multiplex RNA/Protein Expression Analysis System / Stel.. (12.24까지)
마크로텍 마크로텍
마크로텍 Ezscope현미경 마이크로톰 특가판매 및 현미경대여 (9.30까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN] Reading과 형광 Imaging을 하나의 장비로 한 번에!! [Multi-mode micr.. (8.31까지)
케이비티 케이비티
Mixer, Dry Bath, Heating Block, Thermo Shaker, Shaking Incub.. (7.10까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
[에펜도르프코리아] Eppendorf 2020 상반기 프로모션 안내 : 실험실 필수품 피펫,원심분리기,PCR.. (8.8까지)
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
3/6  좌우
17,000
493,000
125,500119,300
924,000
79,50075,600
66,50063,200
136,000129,200
482,000
370,000
52,60050,000
93,20088,600
23,000
109,000
773,000734,400
47,20044,900
49,000
339,400322,500
139,000132,100
6,000
468,000
92,30087,700
482,000
739,000702,100
870,000
최근등록   더보기 >
플라스틱 분해균으로서 장내 미생물이 가지는 의미   07.05
알지네이트 비드와 엔테락 기술의 차이   07.05
DPPH ASSAY로 폴리페놀 함량 정량이 가능할까요?   07.05
Humanized mice   07.05
세균 가시적으로 관측할 수 있을 방법을 알려주실 수 있으신가요??   07.04
동결건조 없이 천연물 추출법   07.04
세균배양 실험 결과 무슨 균인지   07.04
잔여 배지(media)를 사용 후 작은 병에 옮기는 이유가 뭔가요?   07.04
mpo immunization의 control group 설정에 대해   07.04
Bradford 사용할 때   07.04
IDT Korea
제품평가
[비아이코퍼레이션]
e브릭몰(연구용 제품 온라인 구매 사이트)
비아이코퍼레이션
모집인원: 50명
모집기간: ~7/15까지
신청조건: BRIC 회원
평가자 혜택

- 참가자 전원 3만원 상품권 제공

제품평가자 모집중
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크