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gapdh의 primer를 바꿔서 다시 진행해보아도 안나오네요...
이때 primer는 같은 시퀀스로 재 합성을 하신건가요? 아니면 다른 위치를 잡아서 합성을 진행하신건가요?
GAPDH만 안나오나요? target gene은 어떤가요?
B-actin은 25 사이클 이전에 빵빵하게 나오나요?
혹시 레퍼런스 되는 gene의 종은 정확한건가요?
PCR이 안되면 2가지 큰 원인중 하나일것입니다. 하나는 cDNA 문제이거나 다른 하나는 Primer 문제입니다. 이중 앞쪽 사이클에서 잘 나오는 gene이 있다면 cDNA문제라기 보다는 primer 문제일 가능성이 높습니다.
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레벨1
바이오 셜록
(대학생)
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19.10.16 15:53
감사합니다!
beta actin은 22-25사이로 나오는데, 한 두개 26, 27값이 나오는 것도 있습니다.
그외의 다른 타겟 primer 들도 qpcr 해보았는데 나왔습니다.
그런데 gapdh가 안나오네요
primer는 sequence를 바꿔서 다시 진행해보았습니다.
다른 sequence의 gapdh로 한번 더 해봐야할까요?
조언부탁드립니다.
감사합니다.
primer 서열을 적어주시면, 적절한 primer set인지 확인할 수 있을 것 같습니다.