실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
웨스턴 밴드가 detection 되는 위치가 항상 membrane의 위에 잡힙니다
레벨1 Sportsmanship (대학원생)
밴드가 계속 잘 안뜨고 protein 사이즈에 관계없이 사진에서 보이는대로 마치 로딩이 안된 것 처럼 저 위치에만 계속 잡힙니다 (어떤 항체에 관계없이 ㅠ) 도대체 원인이 무엇인지 도저히 감이 안잡힙니다.
고수님들 제발 원인에 대해 같이 한번만 고민해봐주십시오.
사진의 항체는 b-actin입니다. 그러나 저희가 보고자 하는 다른 유전자들도 무조건 저 위치에서만 잡힙니다. Commasie blue로 염색하였을때는 약간 희미하게 로딩이 된 것은 확인할 수 있었습니다. 그래서 단백질의 quality 문제인지 여러 방면으로 고민중입니다 ㅜㅜ 아무 의견이라도 좋은 clue가 될 수 있습니다. 많은 답변 부탁드립니다,.
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