실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
DH5 alpha competent cell을 처음 만드는 초보인데 이 protocol이 맞을까요?
레벨1 잉여맨 (대학원생)
Gene cloning을 위해서 처음 혼자 DH5alpha를 competent cell을 만드는과정에 있습니다. 혼자서 competent cell을 만드는 것은 처음이라 제가 하는 방식이 맞는지 고견을 듣고자 글 남깁니다.
1. LA 200ml(LB배지에 agarose를 넣은) plate들을 만들고 굳힌다
2. DH5alpha의 한 콜로니를 loop로 따서 agar plate에 배양한다.
(streaking하는 것이 맞는건지 제대로 알고 있는지 자신이 없습니다)
3. overnight을 해서 DH5alpha를 agarplate에 키운다.
여기까지는 틀린 것 같지는 않은데 그 다음 glycerol stock을 어떻게 해야하는지 모르겠습니다
agar plate에 새로 자란 DH5alpha 들을 그대로 glycerol stock(액체)에 넣어서 굳혀야 하는건지
그렇다면 조성 비율은 어떻게 하는게 맞는지 궁금합니다.
(loop로 긁은 채로 glycerol stock에 배양하면 될까요?)
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