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질문 클로닝 관련 질문이에요 ㅠㅠ
알예티찡(대학원생)  |  09.19 19:07

 

DH5알파 competent cell을 만들어 클로닝을 진행했습니다.

항상 incert, pUC19, 벡터 넣지 않은 competent cell을 대상으로

항생제 배지에 도말을 진행하는데요..

 

이번에는 벡터를 넣지 않은 competent cell의 플레이트에서 

cell 뭉침이 보이더니 이내 colony가 형성되기 시작하네요 ㅠ..

incert 플레이트에서도 콜로니가 형성되었지만 white/blue 골고루 섞여 있구요..

 

항생제가 적게 들어가 생기는 문제일까요?

plasmid prep을 진행하려고 하는데,

여간 찝찝한게아니에요 ㅠ..

#클로닝
 
#항생제
 
#컨트롤
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채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

항생제 농도 문제 같아 보이며 white colony를  colony PCR을 해 보거나

배양해서 plasmid prep을 해보세요.

 

대왕개구리SPEED  |  09.19 19:10  

흑흑... 그래도 prep 진행이되서 다행입니다

하나 더 여쭙고 싶은데,

항생제를 처리한 배지에 배양후 plasmid prep을 진행합니다.

그렇다면 vector가 없는 colony를 배양하게 될때는 배양이 진행되지 않죠..?

알예티찡  |  09.19 19:24  

항생제 농도 문제를 확인하기 위해서 자란 CP cell colony를 항생제 액체 배지에

한번 배양해 보세요.

안자라는 것이 정상입니다.

 

대왕개구리SPEED  |  09.19 19:28  
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