실험 Q&A Microbiology > Bacteria
pour plating 방법에 대해 여쭤봅니다 도와주세요ㅠㅠ
레벨1 dbwn7819 (대학원생)
제가 pour plating방법으로 며칠째 실험을 진행하고 있는데 잘 되지가 않네요.
미생물이 하나라도 검출될 수 밖에 없는 조건인데, 미생물이 전혀 검출되지 않아서 배지 온도가 너무 높았나, 그래서 미생물이 사멸되었나 생각을 하고 있습니다.
저는 PCA agar를 45도로 식혀 사용한다고 알고 있는데, 이 45도가 너무 높은 온도일까요?( 저는 레이저로 온도계를 이용해서 온도를 쟀고 그 때 45.6-45.8도 정도여서 클린벤치에 들어가 뚜껑을 열고 삼각플라스크를 몇 번 회전시켜 열기를 빼준 후 부었는데 온도가 너무 높아 균이 사멸하는걸까요? )
균이 사멸하는 것 같아서 온도를 42-44도로 잰 후 클린벤치에 들어가 붓게 되면 몇 개 안붓고도 배지가 굳어 고체덩어리가 자꾸 배지에 들어가게 되서 정말 곤란합니다...ㅠㅠ여기서 여러분들이 하셨거나 알고 계신 팁 없을까요! 정말 5번정도 재실험중이라 도움이 필요합니다.
그리고 시료가 우유인데, pour plating방법을 진행하면 우유원액의 지방층 때문인지 배지자체의 색이 변하고 배지 속 색깔이 얼룩덜룩해지는데, 이건 그냥 감수해야하는 문제인가요? 물론 희석배수를 높여서 진행한 건 배지색이 얼룩덜룩해지는게 덜했습니다.
마지막으로 15ml를 잴 수 없어 페트리디쉬의 반정도 부어 뚜껑을 닫고 돌리는데 그 때, 뚜껑에 묻게 되는데 반정도의 양이 너무 많은걸까요?
그런데도 배양하면서 배지가 마르거나 갈라지는 현상이 있는데 이는 배지의 양이 너무 적어서인것 같은데 도대체 어떻게 해야할지 모르겠습니다..
pour plating 실험법 대해 자세히 설명을 해주셔도 되고 저에게 어떠한 실험관련 조언이어도 유념하여 듣겠습니다. 답변 부탁드려요!! 감사합니다.
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