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 전체 > Chemical biology > Synthesis
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질문 competent cell제작시 30분에서 1시간정도 얼음에 보관하는 이유는 뭔가요???
알swoon(대학생)  |  2019.09.18 22:42

절차마다 30분정도 보관하고 있으라고 하는데 이유가 있나요...???

#competent cell
 
#transformation
 
#ice
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2019.09.18   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

칼슘이온이 cell wall의 LPS inner core에 결합 및 cell membrane의 인지질에

결합하는 시간이 필요합니다.

결과적으로 정상적인 대장균에 칼슘이온을 처리하면 cell wall과 membrane의

구조가 상당히 약화됩니다.

cell wall에 결합한 칼슘은 TF 시키는 DNA의 neutralization 및 LPS 안으로

쉽게 이동시키는 역활을 하며 cell membrane의 인지질에 결합한 칼슘이온은

DNA가 cell 안으로 쉽게 들어오게 합니다.

 

꽃개구리느림보  |  2019.09.22   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

증식을 억제하기 위해서예요. Competent cell의 성능은 생장곡선의 단계와 세포 밀도에 따라 엄청 달라집니다. 원래 의도했던 단계에서 생장을 완전히 정지시키기 위해서 저온으로 내리는 겁니다. 

대왕개구리SPEED  |  2019.09.22   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

CaCl2 용액에서 대장균을 실온에서 보관해도 자라지 않습니다.

저온에서 보관하면서 CP cell을 만드는 것은 균의 성장을 억제하기

위하 것이 아니라 satble하게 CP cell을 만들기 위해서 입니다.

동일 균 농도로 실온 및 ice에서 CP cell을 만들어 plasmid를 TF 한번

해 보세요.

꽃개구리느림보  |  2019.09.28   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

절차마다 쉬는 건 그렇네요.

잘 생각해 보지 않았던 주제인데 하나 배웠습니다.

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