실험 Q&A Mol. Biol.-RNA > etc.
RNA와 비타민b12가 너무 강하게 결합한거 같습니다.
레벨1 몽씨 (대학생)
RNA aptamer관련 내용입니다.
random sequence를 가진 RNA pool(전체 길이:116nt, 양끝은 고정서열 가운데 30서열이 random입니다.)에서 압타머 선별과정을 통해 비타민 B12와 결합하는 RNA압타머를 선별하려고 합니다.
비타민B12와 결합한 RNA 압타머의 서열을 알기위해 RT-PCR을 진행했는데
밴드상 길이가 가운데 랜덤 서열이 짤리고 양끝 고정서열(프라이머가 붙은 서열)만 존재했습니다.
추즉 상 RNA와 비타민이 너무 강하게 결합해서 RT 혹은 PCR과정에서 DNA중합효소가 작용하지 않았나 싶습니다.
질문: RNA와 비타민B12의 결합력을 약하게 안다음에 RT-PCR을 진행해보려 합니다. 결합력을 약하게 하는 방법이 있을까요?
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