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 전체 > Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
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질문 Cell extraction에 관해 질문있습니다.
알대연(대학원생)  |  2019.09.18 16:15

cell을 SDS sample buffer로 harvest하기 전에

media 제거 후 wash를 생략해버렸는데,

wash에 따라 결과가 달라진 적이 있는지 궁금합니다.

#cell
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2019.09.18   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

media에 있는 미량성분이 영향을 주는 실험에는 결과값에 영향을 주겠죠.

질문에서 어떤 결과값을 구하는지 모르기 때문에 영향이 있을수도 있고

없을수도 있습니다.

만약 전기영동을 위한 시료 준비라면 큰 영향은 없을 것으로 생각이 되나

FBS가 포함된 media의 경우 washing을 해 주는 것이 남아있는 media 유래

미량 단백의 영향을 최대한 제거가능할것 같습니다.

뒷다리hcp074  |  2019.09.25   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

SDS sample buffer로 harvest 하셨다는 것으로 보아 SDA-PAGE나 western blot을 진행하시려고 하시는것 같은데요,

wash step을 빼먹으면 FBS의 각종 단백질이 섞여 있게 됩니다.

western blot을 하게 되면 내가 보고 싶은 단백질 band만 보게 되므로 큰 문제 없으나, Coomassie blue나 silver staining 등과 같은 염색법으로 분석한 단백질 모두를 확인하시게 되면, 70 kDa 근처에 엄청 뚱뚱한 albumin band를 관찰하실 수 있으실겁니다.

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