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 전체 > Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
조회 2733  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 Cell extraction에 관해 질문있습니다.
알대연(대학원생)  |  09.18 16:15

cell을 SDS sample buffer로 harvest하기 전에

media 제거 후 wash를 생략해버렸는데,

wash에 따라 결과가 달라진 적이 있는지 궁금합니다.

#cell
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

media에 있는 미량성분이 영향을 주는 실험에는 결과값에 영향을 주겠죠.

질문에서 어떤 결과값을 구하는지 모르기 때문에 영향이 있을수도 있고

없을수도 있습니다.

만약 전기영동을 위한 시료 준비라면 큰 영향은 없을 것으로 생각이 되나

FBS가 포함된 media의 경우 washing을 해 주는 것이 남아있는 media 유래

미량 단백의 영향을 최대한 제거가능할것 같습니다.

대왕개구리SPEED  |  09.18 17:18  

SDS sample buffer로 harvest 하셨다는 것으로 보아 SDA-PAGE나 western blot을 진행하시려고 하시는것 같은데요,

wash step을 빼먹으면 FBS의 각종 단백질이 섞여 있게 됩니다.

western blot을 하게 되면 내가 보고 싶은 단백질 band만 보게 되므로 큰 문제 없으나, Coomassie blue나 silver staining 등과 같은 염색법으로 분석한 단백질 모두를 확인하시게 되면, 70 kDa 근처에 엄청 뚱뚱한 albumin band를 관찰하실 수 있으실겁니다.

알hcp074  |  09.25 13:38  
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