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 전체 > Molecular Biology-Protein > Expression/Purification
조회 2675  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 ion exchange chromatography capacity 계산
올챙이강영임(대학생)  |  09.18 11:05

현재 antibody를정제하고 있습니다.

Affinity chromatography에서 어느 정도 정제 후에 cation exchange를 하려고 합니다. 참고로 제 sample 분자량은 90kDa정도 되고, PI는 8.5 정도입니다.

column은 GE HiTrap SP-HP 5ml을 사용하려고 하고 

buffer는 20mM sodium phosphate, pH7.0을 사용하려고 합니다.

처음 60mg/L의 cell culture media를 affinity (protein A)를 하고 나니 335mg/L 농도의 fraction 16ml을 얻었고 이를 다시 cation exchage (GE HiTrap SP-HP 5ml)를 수행하려고 하는데 ion capacity를 잘 모르겠어서 찾아보니

-CH2CH2CH2SO3가 charged group이고 ion capacity는 0.15~0.2mmole H+/ml resin이라고 합니다.

잘 이해가 되지 않아서 GE에 물어봤더니 

55 mg ribonuclease/ml gel.

Buffer solution:
0.1 M sodium acetate, pH 6.0

Flow rate:
1 ml/min

다고 하는데 이런 data를 받아도 이해가 되지 않습니다.

 

좀 차근차근 설명해 주세요

 

 

#ion exchange capacity 계산
 
#protein purification
 
#ion capacity
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

full Ab가 90kDa인가요?

speedk89@naver.com으로 연락 주시면 차근차근 알려드리겠습니다.

대왕개구리SPEED  |  09.18 11:23  
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