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써니22
(비회원)
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19.09.16 17:45
1. 양쪽 젤을 잘 끼웠나 확인합니다.
- 끝까지 잘 밀어서 끼우지 않으면 비스듬하게 내려갈수 있습니다.
2. running buffer가 새지 않는지 확인합니다.
- 사진을 보니 버퍼 또한 비스듬해 보이는데...
buffer를 가득 평행하게 채웠더니, 저는 똑바로 내려가더라구요.
이게 원인이 될 수 있습니다!
3. Sample의 농도가 다르거나, 로딩하는 양이 다른 경우.
- 저는 정량 후, 로딩하는 양까지 D.W로 통일해서 넣어줍니다.
sample 종류가 뭔지 모르겠지만 sample이 넓게 퍼지는 경우는 대부분 sample에
전기영동을 방해하는 물질(예: 농축한 시료, 시료에 포함된 염 등)이 많아서
내려가는 힘에 저항이 많이 걸리기 때문에 그렇습니다.
sample의 BPB line 색을 보니 pH는 문제가 없는것 같습니다.
왼쪽 1번시료가 2번 시료보다 더 저항이 걸리고 있으며 그 원인으로 인해서
제일 오른쪽 마커 레인이 내려가는 쪽보다 덜내려 가며 전체 BPB line이
경사지게 내려갑니다.
해결 방법은 탈염을 하거나 sample loading양을 줄여서 전기영동하면 개선됩니다.
SDS sample buffer를 샘플의 양 옆 lane에 loading하면 퍼지는 것을 줄일 수 있습니다.
band가 휘는 것은 loading buffer를 넣고 전기선 밑에 기포가 없는지 확인해보시면 좋습니다.