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질문 sds-page band 휘고 퍼지고..ㅠ_ㅠ
알후루룩ㄹㄹㄹㅇㄴㄹ(대학생)  |  09.16 17:31

안녕하세요.. gel 실험하고있는 초보인데여,,

샘플넣고 로딩하면 밴드가 엄청 퍼지고 밴드가 내려가면서 휘어지는데

혹시 고칠 수 있는 방법이 없을까요ㅠㅠ..

upload_image

#sds phse
 
#band broadeneing
 
#gel
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

1. 양쪽 젤을 잘 끼웠나 확인합니다.

- 끝까지 잘 밀어서 끼우지 않으면 비스듬하게 내려갈수 있습니다. 

 

2. running buffer가 새지 않는지 확인합니다. 

- 사진을 보니 버퍼 또한 비스듬해 보이는데...  

buffer를 가득 평행하게 채웠더니, 저는 똑바로 내려가더라구요. 

이게 원인이 될 수 있습니다! 

 

3. Sample의 농도가 다르거나, 로딩하는 양이 다른 경우. 

- 저는 정량 후, 로딩하는 양까지 D.W로 통일해서 넣어줍니다. 

 

써니22  |  09.16 17:45   

sample 종류가 뭔지 모르겠지만 sample이 넓게 퍼지는 경우는 대부분 sample에

전기영동을 방해하는 물질(예: 농축한 시료, 시료에 포함된 염 등)이 많아서

내려가는 힘에 저항이 많이 걸리기 때문에 그렇습니다.

sample의 BPB line 색을 보니 pH는 문제가 없는것 같습니다.

왼쪽 1번시료가 2번 시료보다 더 저항이 걸리고 있으며 그 원인으로 인해서

제일 오른쪽 마커 레인이 내려가는 쪽보다 덜내려 가며 전체 BPB line이

경사지게 내려갑니다.

해결 방법은 탈염을 하거나 sample loading양을 줄여서 전기영동하면 개선됩니다.

대왕개구리SPEED  |  09.16 17:59  

SDS sample buffer를 샘플의 양 옆 lane에 loading하면 퍼지는 것을 줄일 수 있습니다.

band가 휘는 것은 loading buffer를 넣고 전기선 밑에 기포가 없는지 확인해보시면 좋습니다.

알ad  |  09.19 11:13  
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