[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
https://www.ibric.org/myboard/list.php?Board=news&PARA3=54
스폰서배너광고 안내  배너1
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
조회 2940  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 정말 급해요 ㅠㅠ 전기영동 실패 이유가 뭘까요??
알빨강토마토1(일반인)  |  2019.09.08 01:49

upload_imagePDNA Extraction 이후 PCR 전기영동 했는데 DNA 농도를 nano drop으로 측정했을 때는 꽤 높았고 순도도 괜찮았어요 Ladder 다음부터 1,2,4,5,6번째가 저희 조에서 실험한건데 6번째 빼고는 band가 아예 안나왔어요 

다른조가 실패해서 그 조가 저희 조 남는 젤 well에다 넣었는데 시간이 꽤 걸렸는데 이게 혹시 결과에 영향을 줄까요 ..?

실패 원인을 꼭 알려주세요ㅠㅠ

#전기영동
 
#전기영동 실패 원인
 
#아가로오스 젤
답변하기
검색광고 검색광고
[(주)필코리아] NEB(New England Bio labs)한국총판 필코리아에서 주문하세요!
NEB (New England Bio labs) 한국총판 필코리아입니다. 저렴하고 빠른 배송으로 고객의 연구비와 시간을 절약해드립니다. 전국 어디서나 주문하세요. T:02-2105-7020, F:02-2105-7025, mail: info@philekorea.co.kr
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2019.09.08   

5번은 양이 적지만 band는 있습니다.

1, 2, 4 lane은 plasmid가 없는데 실패 원인은 여러가지가 있겠지만 plasmid 분리가

안된 것이 가장 큰 원인 아닐까합니다.

알빨강토마토1  |  2019.09.08   

Plasmid가 없다는게 무슨 뜻이죠?? 붕어의 CO1 유전자 사용했어요

대왕개구리SPEED  |  2019.09.08   

plasmid가 아니고 PCR 증폭결과네요.

결과적으로 PCR 증폭이 안되어서 band가 안보이는 것인데 이런 실험 수업에서

발생하는 문제는 여러 사람이 실험하기 때문에 정확한 문제를 알기 어렵습니다.

모두 동일한 DNA로 동일한 시약 및 조건으로 PCR을 해도 잘나오는 조와 안나오는

조가 있습니다.

추출한 DNA는 각 조에서 추출했나요 아니면 추출한 DNA를 모든 조에서 동일하게

사용 했나요?

알빨강토마토1  |  2019.09.08   

각 시료가 모두 다른 붕어에서 시료를 각자 채취했어요

대왕개구리SPEED  |  2019.09.08   

각자 DNA를 분리한것이 아니라 조별로 DNA를 분리한 것이죠?

분리한 DNA는 전기영동으로 확인했나요?

분리한 DNA에 문제가 있을 수도 있고 PCR 반응액 혼합 할 때의 문제도 있을 수도

있습니다.

증폭 조건은 모든 조에서 같을 테니 문제가 없을 것으로 보입니다.

알빨강토마토1  |  2019.09.09   

각자 DNA 채취했고 Nanodrop으로 농도랑 순도 확인해서 DNA 추출에는 문제 없었어요

혹시 전기영동 시작하기 전에 well에 시료 넣는데 시간이 오래 걸리면 결과에 영향을 주나요???

대왕개구리SPEED  |  2019.09.09   

얼마나 시간이 걸렸는지에 따라 다릅니다.

그래도 수업 시간에 시간이 지연된 정도로는 이유가 안될겁니다.

분리한 DNA를 전기영동으로 확인 안했으면 거기에도 이유가 있을수 있습니다. 

 

간장게장  |  2019.09.11    

PCR 재료를 모두 넣고 잘 섞어주지 않으면 PCR이 안 되는 경우도 있습니다.

재료를 tube에 넣고, 뚜껑을 덮고 손끝으로 20번 정도 톡톡 쳐서 혼합해 주세요.

그리고 나서 원심분리해서 tube 아래쪽으로 시료들이 모이도록 한 후에 PCR 기계에 넣어 보세요.

 

뒷다리영빙구  |  2019.09.16   

저..다른건 다른분들이 잘말씀해주셨는데

한가지만 언급하자면 Nanodrop으로 측정했다고 해서 DNA가 잘뽑혔다고는 말하기 힘들듯해요

일반적으로 DNA가 잘 뽑혔다를 판단할때는 gel 전기영동하는게 정석이구요. 물론 Nanodrop을 통해 DNA 양이나 순도등등을 판단을 하지만 Nanodrop자체가 DNA의 유무를 판단하긴 어려워요(단순 흡광도만 보는거라서요^^) 뽑은 plasmid DNA를 전기영동해서 확인해보구 이상없으면 다시 PCR진행해서 봐보는게 좋을듯해요!

답변하기
할인행사 광고 검색광고
코람바이오텍 코람바이오텍
[OriGene] IHC Reagents, shRNA, CRISPR, Proteins, Lentivirus.. (4.27까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
Eppendorf New 25mL Conical Tubes : 혁신적인 디자인과 다양하고 편리한 사용 (4.1까지)
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
βeta
4/6  좌우
92,80088,000
90,60086,000
374,800356,000
102,30097,000
158,400150,000
147,600140,000
272,300259,000
121,100115,000
691,800657,000
119,600114,000
71,30068,000
603,600573,000
140,100133,000
242,000230,000
316,000300,000
867,100824,000
239,800228,000
404,600384,000
522,300496,000
225,200214,000
153,000145,000
199,100189,000
625,100594,000
79,70076,000
최근등록   더보기 >
knock out 마우스 국내보유 검색방법   02.23
3M petri dish를 사용한 미생물 측정 방법 (대장균, 일반세균용)   02.23
발효액 안에서 미생물 추출   02.22
손세정제를 소독용 에탄올 대신으로 써도 될까요?   02.22
Desoxycholate Lactose Agar 배지 색 변함   02.22
ImageJ mean gray value 질문입니다   02.22
단백질 농도 측정 시 계산 법   02.22
코로나19 같은 바이러스 관련 실험문의입니다!!(급합니다ㅜ)   02.22
세포가 오염돼서 죽은 거 같아요   02.21
mouse 실험에 적당한 전기자극은 어느정도일까요?   02.21
라이브셀인스트루먼트
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아