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proteinase K는 37도에서 50~60도까지 반응이 가능합니다.
처리시간은 시료에 따라 다르지만 cell의 경우 적어도 10분은 처리해야 합니다.
RNase A는 15도~70도 까지 반응이 가능합니다.
처리시간은 cell이 분해되어 RNA가 노출이 되어 있으면 1~2분 처리해도 RNA가
분해됩니다.
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레벨2
z크핫z
(대학생)
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19.08.21 13:11
매번 감사합니다.
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레벨5
Marine
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19.08.21 13:47
추가로.. Proteinase K 는 SDS 같은 detergent 가 약간 있을 때 활성이 올라갑니다.
Cell lysis 하실 때, SDS 가 들어간 Lysis buffer 를 쓰지 않고 PBS 에 Proteinase K 만 쓰신다면,
Lysis buffer 를 쓰시거나, PBS 에 SDS 를 0.5%-1% 정도로 넣고 proteinase K 처리 후 56 도에서 30분 이상 Lysis 하시면 더 잘 lysis 될겁니다.!
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레벨2
z크핫z
(대학생)
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19.08.22 12:47
그럼 1% SDS 를 얼마나 넣어야 하나요?
Proteinase K 20ul 를 넣는 기준에서요 ㅠㅜㅠ