실험 Q&A Immunology > etc.
percoll 수행시 문제점이 있습니다.
레벨1 홍정원 (과기인)
실험방법중 질문드립니다.
제가 human blood 에서PBMC와 neutrophil을 동시에 분리하려고 하는데
74% percoll(percoll 7.4ml + 10xPBS 1ml+DW 1.6ml)과 55% percoll (percoll 5.5ml +
10xPBS 1ml+DW 3.5ml)
을 만들어서 순서대로 tube에 overay후 blood 원액 넣고 350g에 20분 실온에서
centrifuge하는데 PBMC는 층이 분명하게 생기는 반면에 neutrophil층은 잘 안보이
네요....그리고 RBC가 바닥에 가라앉아야 됨에도 불구하고 가라 않지 않고 살
짝 떠 있는것 처럼 보입니다...
무엇이 문제인지 도통 모르겠습니다.
경험있으신 분들의 조언 부탁드립니다.
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