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 전체 > Microbiology > Bacteria
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질문 항생제 감수성 검사 결과 분석 관련 질문입니다
알빅토리(일반인)  |  08.19 20:03
첨부파일 파일첨부: 캡처.PNG (1.03 MB)
이미지 첨부파일

안녕하세요, 천연항생물질(마늘, 양파, 생강, 고추즙)의 항생 작용에 관해 실험을 진행 중인 고등학생입니다.


디스크확산을 이용한 항생제 감수성 검사에서 결과 분석에 어려움이 있어 문의드립니다.

첨부한 사진이 저희의 실험 결과인데요, 저희가 이론 조사를 했던 것과는 달리 대장균에서는 클리어존이 거의 생기지 않았더라고요ㅠㅠ (마늘에만 미세하게 생겼어요)


유산균과 대장균의 희석 비율(균액:증류수=1:6)이나 사용량, 항생물질 사용량, 즙 농도 등은 모두 동일하게 했습니다.


지금 실험 마감이 얼마 남지 않아서 실험을 딱 한 번만 다시 해볼 수 있는 상황입니다. 가능하면 정확하게 실패 원인을 짚고 넘어가고 싶어서 브릭에 계신 전문가 분들의 도움을 청하고자 이렇게 글을 올리게 되었습니다.

아래는 저희가 나름대로 분석해본 원인인데 한 번 봐주시고 의견 남겨주시면 정말정말 감사하겠습니다!


***

1. 균을 너무 적게 희석했다. 약 10배 정도로는 희석했어야 했다.
(참고로 균은 생물나라 사이트에서 구입했습니다)
ㄴ 그런데 원래 균을 많이 희석하지 않았다고 항생 효과가 나타나지 않는 경우도 있나요?ㅠ

2. 균을 너무 오랫동안(원래 일주일 보관인데 실험실 사정상 약 2주 냉장보관했습니다) 보관한 탓에 변질되었다.
ㄴ 그런데 클리어존이 생성되지 않았을 뿐이지 균 배양 자체는 잘 되어서 이것도 아닌 것 같긴 합니다...

3. 항생물질 즙의 농도(5%)가 너무 묽었다.
ㄴ 유산균에는 묽은 농도에서도 항생작용을 하는데 대장균에는 짙은 농도에서만 항생작용이 일어날 가능성도 있을까요?


***

가능한 고등학생 수준의 쉽고 자세한 답변 부탁드리겠습니다.
감사합니다.

#항생제감수성
 
#디스크확산법
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

항균소재는 어떻게 제조했으면 disc에 얼마나 올렸나요?

대왕개구리SPEED  |  08.19 20:10  

항균 물질 제조는 마늘, 생강, 양파, 고추를 믹서기로 간 후 거즈를 이용해 즙을 만든 뒤, 즙 5g + 멸균생리식염수 95g  을 맞춰서 5% 용액을 만들었습니다.

(멸균증류수가 없어서 멸균생리식염수를 사용했는데, 혹시 이것도 원인이 될 수 있을까요?)

그리고 disc에는 0.3ml씩 올렸습니다

 

+) 본문에 증류수로 균을 희석했다고 잘못 썼는데

증류수가 아니라 멸균생리식염수였어요!

알빅토리  |  08.19 20:16  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

생리식염수를 사용해도 무방합니다.

disc 한개에 0.3ml(300ul)가 올라가던가요?

예비실험을 추출물 농도별로 했으면 좋았을것 같습니다.

아마도 추출물 농도가 너무 낮아서 그럴 가능성이 있습니다.

1. 유산균과 대장균을 배지에 spreading한다.

2. 추출물을 적어도 2가지 농도로 준비한다.

유산균 : 5%, 20%

대장균 : 10%, 30%

3. 각 균에 각각의 추출물 2가지 농도를 disc에 올린다.

4. disc 및 배지에 추출물이 모두 흡수되면 배양한다.

disc 올리는 것은 아래 그림처럼 하면 됩니다.

upload_image

대왕개구리SPEED  |  08.19 20:33  

일단 있는 그대로 분석하세요.

대장균은 4가지 물질에서 성장억제가 관찰되지 않았으므로 사용한 농도의 물질에서는 성장억제능력이 없다.

유산균은 사용한 농도의 마늘과 고추추출물에서 성장억제능이 확인되며 성장억제환의 크기는 지름 몇 mm 이다.

양파는 사용한 농도에서 유산균의 성장억제능이 없으며 생강은 사용한 농도에서 약한 성장억제능을 보이며 성장억제환의 크기는 몇 mm이다.

 

두 세균의 성장을 억제시키는 추출물의 최소농도를 알기 위해서는 추출물을 원액부터 몇단계로 희석해서 성장억제를 확인하는 것이 필요하다......

 

뭐 이정도가 결론이 되겠네요.

 

대왕개구리강시  |  08.20 13:35  

늦었지만 두 분 모두 정말 감사드립니다!ㅠㅠ

비록 성공시키지는 못했지만 그래도 덕분에 의미있는 재실험을 할 수 있었던 것 같습니다 정말 감사합니다 :)

알빅토리  |  08.26 19:35  
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