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웨스턴을 하기 전에 그냥 SDS-PAGE를 쿠마시염색을 해 보세요.
쿠마시 염색으로 각 샘플의 단백질 양을 확인하고 보정한 다음. 다시 한 번 더 SDS-PAGE하고 쿠마시 염색을 해서 각 lane에 건 샘플의 밴드 intensity가 같은 것을 확인하는게 좋습니다.
그냥 로우리법 등으로 단백질 정량만해서 젤로딩하는것보다는 트러블슈팅이 편합니다.
*실험 각 단계마다 확인하고 갑시다*
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레벨1
Pika
(대학원생)
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19.08.19 12:24
쿠마시를 할 수 없는 경우는 어떻게 해야 할까요?
쿠마시 염색을 안하면 밴드의 상태와 양을 알기가 어렵습니다.
정 안되면 membrane에 transfer 한 다음 Ponseau S 염색을 해서 볼 수는 있지만 ....