[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
실험복 제공
스폰서배너광고 안내  배너1
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-Protein > Expression/Purification
조회 1281  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 sds page band가 안보이는 현상
알수바기(대학생)  |  2019.08.16 09:59
첨부파일 파일첨부: KakaoTalk_20190816_094501760.jpg (69 KB)
이미지 첨부파일

안녕하세요?

protein purification전에

expression의 확인을 위해서 empty vector와 target protein을 같이 sds page로 확인해 보았습니다.

ladder옆에 빈 공간 1,2,3번이 empty vector인데 1번은 sonication후에 centrifuge하기 전 2번은 centrifuge후 supernatant를 3번엔 pellet을 buffer로 희석시켜서 staining하여 loading 하였습니다.

4,5,6/7,8,9은 각각 target protein이고 이것들 또한 위 조건과 같이 진행하였습니다.

총 3번정도 시행하였는데

제가 샘플은 혼동하여서 잘못 loading 하였거나, cell 농도가 적어서 안보이나 싶어서 확인까지 하면서 했는데 3번째에도 같은 결과가 나왔습니다.

 

샘플 loading은 ladder를 제외하고 각 12ul씩 걸었는데 혹시 sample loading 양을 높여야 하나요? 아니면 다른 문제가있는 것인가요?

#SDS-PAGE
 
#protein expression
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리강시  |  2019.08.16   

1,2,3 번 lane에 잘 보면 밴드가 있습니다.

결국 loading 양이 적어서 밴드가 안보이는 것 같습니다.

무슨 실험이든 하려면 시료의 양을 확인하면서 하는 것이 좋습니다. 12ul 라고 하지만 그 속에 얼마나 많은 단백질이 들어있는지 알지 못하면 안돼죠.

시료가 준비되면 단백질 정량을 해 보세요.

정량한 값을 기초로 각 well에 같은 양의 단백질을 걸면 비교적 보기 좋은 밴드 패턴이 나올겁니다.

답변하기
할인행사 광고 검색광고
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
Synthego CRISPR-Cas9, sgRNA을 경제적으로 구매하는 방법 (2.29까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
Eppendorf New 25mL Conical Tubes : 혁신적인 디자인과 다양하고 편리한 사용 (4.1까지)
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
βeta
6/6  좌우
199,100189,000
121,100115,000
603,600573,000
242,000230,000
153,000145,000
119,600114,000
316,000300,000
92,80088,000
867,100824,000
272,300259,000
625,100594,000
225,200214,000
90,60086,000
691,800657,000
522,300496,000
71,30068,000
102,30097,000
79,70076,000
140,100133,000
147,600140,000
158,400150,000
374,800356,000
239,800228,000
404,600384,000
최근등록   더보기 >
Facs 샘플 처리 질문드려요   02.19
급해요! co-IP에서 Western   02.18
H9C2 rat cardiomyocytes와 AC16 human cardiomyocytes...   02.18
왜 primary hepatocyte 혹은 줄기세포로 분화된 hepatocyte는 증식하지...   02.18
아드레날린 수용액으로 제조방법(MSDS는 있으나)이 궁금합니다~   02.18
caco-2 cell subculture   02.18
상한 조직에서 gDNA 추출법...   02.18
embiel HDL test kit 설명을 보면   02.18
Phenol chloroform precipitation 어떻게 하는 건가요?   02.18
고온균 고체배지   02.18
오스테오시스
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아