실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
gDNA로 PCR을 계속 진행하는데 결과가 나오지않습니다.
레벨1 핳귀찮아 (대학원생)
안녕하세요.
제 주변에 물어볼 선생님들이 없어서 여기에 질문을 드립니다.
일단 제가 cell에 DNA type virus를 infection 시킨 후에
gDNA extraction kit를 사용하여 gDNA를 추출하였습니다.
2xTaq mix, primer(10 pmole), liution buffer, 20ng gDNA를 혼합하여
RT-PCR을 진행하였습니다.
primer 같은 경우에는 논문을 찾아서 디자인하였습니다.
pcr band를 전기영동으로 확인하였을때 band가 계속 관찰 되지않아서
annealing 온도가 안 맞아서 안되나 싶어서 touchdown pcr을 진행하였습니다.
이 방법을 사용해서 진행하였을때도 band가 나오지않아서 막막합니다.
왜 band가 관찰되지 않는건가요...
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