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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
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질문 PCR cycle
알Biotechnic(과기인)  |  2019.08.02 01:53
PCR 과정

95도 2min
94도 30sec - Tm 30sec - 72도 (1min/1kb) x 25-40cycle
72도 5min
4도

protocol에 이렇게 적혀있는데, 그러면
1 cycle : 95도 2min - Tm 30sec - 72도 (1min/1kb)
2 cycle : 94도 30sec - Tm 30sec - 72도 (1min/1kb)
마지막 cycle : 94도 30sec - Tm 30sec - 72도 5min - 4도
인 거에요? 아님,

1 cycle : 95도 2min - 94도 30sec - Tm 30sec - 72도 (1min/1kb)
2 cycle : 94도 30sec - Tm 30sec - 72도 (1min/1kb)
마지막 cycle : 94도 30sec - Tm 30sec - 72도 (1min/1kb) - 72도 5min - 4도
인 거에요?
#PCR
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2019.08.02   
나와있는 그대로 95도 2분과 72도 5분은 cycs에 포함되는것은 아니고 1회 진행합니다.
95도 2분 후 부터 cycs이 시작하여 95도, Tm, 72도를 25~40회 진행 후 72도 5분을 1회 진행합니다.
그리고 annealing은 Tm이 아니라 최소 Tm-5도~7도 정도 해야합니다.
따라서 Tm이 아니라 annealing temp.가 들어가야 합니다.
oljijjafio;  |  2019.08.06    

PCR 과정 

95도 2min 
94도 30sec - Tm 30sec - 72도 (1min/1kb) x 25-40cycle 
72도 5min 
4도 

 

이라고 써있다면 (Tm이 아니라 annealing temp. 인건 차치하고)

 

95도2분-94도30초-Tm30초-72도x초

            -94도30초-Tm30초-72도x초

            -94도30초-Tm30초-72도x초

            ...

            -94도30초-Tm30초-72도x초 - 72도 5분(x초에 추가해서 더)-끝(4도 또는 저온으로 내려서 지속)

 

이라는 의미입니다.

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