실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
전기영동 시, band shift 현상이 나타납니다..
레벨1 쏭23 (대학원생)
안녕하세요. 올해 석사로 입학한 학생입니다.
대학원에 들어와서 처음 cloning을 진행하게 되었습니다.
실험실에 셋업이 다 되어있는 상태라, 저는 실험만 하면 되는데요,
CRISPR/Cas9_ PX459 vector 상태를 확인하고자
1. mini prep으로 plasmid 를 뽑고,
2. EcoR1 으로 enzyme cut을 하였습니다.
그결과,
DNA 농도 : 120.4ng/ul , A260= 2.409, A280=1.206, 260/280 = 2, 260/230=2.04 로
enxyme cut 시, 8.5kb, 670bp 로 band 2개가 나타나야 합니다.
사진처럼 2개의 밴드는 미세하지만 나타나는 것 같은데,
문제는 size가 shift 되었다는 것입니다. cloning 첫 단계라 확실하게 확인이 된 후, 다음 step을 진행하고 싶은데, 처음부터 막혀버렸네요ㅜㅜ..
혹시 원인이나 문제점을 아시는 분들 있으시면 답변 부탁드립니다!!
감사합니다.
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