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질문 sample 농도가 약한데 western blot은 어떻게 하나요?
뒷다리lovedanial(대학생)  |  07.24 14:05

westrn blot시 sample 단백질 정량했을때,

mean conc가

3.481

1.389

1.353

2.250

정도 입니다..

western시 너무 약해요...

밴드가 너무 가늘어요..조금더 진하게 하고싶을때는 어떻게 해야하나요?

 

#etc
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

우선 1.3 정도면 30ug도 로딩이 안될거같긴한데... maximum으로 내려보세요 우선.

그래도 약하게 나오시면 antibody ratio를 조절하셔서 해보세요.

그래도 약하게 나오시면 protein을 뽑으실때 (Cell이라는 가정하에) duplicaiton을 하시거나 조금 더 큰 dish나 plate에서 뽑으시는 것을 추천드립니다.

뒷다리오토파징  |  07.24 14:11  
보통 western sample 농도 어느정도로 나오시나여?
뒷다리lovedanial  |  07.24 14:33  

6well 기준으로 havest했을 시, 30ug 농도로 충분히 5번이상 로딩할 수 있는 량 나옵니당

cell seeding 하실 때 cell을 더 깔아주시거나 아니면 culture dish를 grade up 해서 실험해보세요

개구리kakaoblack99  |  07.24 17:40  
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