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 전체 > Molecular Biology-DNA > Gene Cloning
조회 355  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 miniprep한 DNA를 다시 키우려고하는데..
알ㅎOㅎ(과기인)  |  07.22 16:34

miniprep해서 sequence맞는거 까지 확인을 하였습니다.

이 DNA stock을 더 만들고 싶은데 어떻게 해야할까요...?

제가 모르고 따로 cell stok이나 large prep을 안만들었어요

가지고있는거는 딱 miniprep한  DNA뿐입니다ㅜㅠ

이것마저 양이 얼마안남았는데..

어떻게 해야할까요?

streaking해도되나요? 아니면 LB 액체배지에 키워서 다시 miniprep하면 되나요?

cp cell에 다시 넣어서 TF해서 하면되나요..?

알려주세요ㅠㅠ

 

#miniprep
 
#증폭
 
#transformation
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

DNA는 셀이 아닙니다.

DNA를 셀에 넣는 작업을 transformation이라 합니다.

이렇게 형질전환된 셀을 스탁하시면 됩니다.

금개구리안재진  |  07.22 16:46  

그럼 이 DNA를 다시 CP cell에 넣어서 TF해서 miniprep하면 된다는 말씀이시죠??

알ㅎOㅎ  |  07.22 17:07  

네. 말씀하신 대로 하시면 됩니다.

올챙이Molang  |  07.22 22:56  

CP cell에 TF 한 후에 colony를 inoculation 해서 액체 배지에 항생제와 함께 키운 후 50% glycerol로 cell stock을 만들어서 deep freezer에 보관하면 언제든 DNA prep이 가능합니다.

그리고 당장 DNA가 다량이 필요하다면 midi 혹은 maxiprep을 해서 다량 확보하면 됩니다.

중요한 것은 항상 selection에 사용한 항생제가 포함된 배지를 사용해야 한다는 것입니다.

개구리식스센스  |  07.23 09:45  
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