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질문 Tris-Cl 제조 및 버퍼사용
올챙이happylove951(대학생)  |  07.19 16:33

Triton lysis buffer를 250mL 만들려고 하는데요,

NaCl이나 KCl 같은 케미칼은 분자량 계산해서 각각 해당 무게만큼 측정후 넣었는데,

'10 mM Tris-Cl, pH 7.4'를 얼마나 넣어야 하나요?

우선 10mM Tris 에다가 물을 넣고 HCl로 pH를 맞추면 10mM Tris-Cl이 되는데, 이것의볼륨을 얼마나 넣어야하나요? (250mL기준)

 

#buffer
 
#Tris-Cl
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10배 농축액인 100mM을 만드세요...

그리고 25ml을 넣어주시고 다른 케미칼들 넣어 주시고 250ml을 맞춰주시면 됩니다.

금개구리안재진  |  07.19 16:40  
이런 질문에는 항상 고민된다.
고기를 잡아 주나 낚시하는 방법을 알려 주나?
다음에도 고기를 스스로 잡으려면 낚시법을 알려 주는 게 맞다.

퍼센트(100mL 개념)를 제외한 농도는 Liter 개념이다.
농도를 맞추는 방법은 모든 걸 넣고 1L로 부피를 맞추는 것이다.

분자량이 100이라면, 1M은 분자량g, 즉 100g을 물에 녹여 최종 부피가 1L 가되도록 맞추면 된다.
250mL을 만들려면 1L의 1/4이니 25g을 물에 녹여 최종부피가 250mL이 되게 하면 된다.

1L 기준으로 용질 100g을 녹여야 한다면 대략 1g을 1mL 정도로 잡고 약 900mL 정도의 물에 녹인 후 부피를 재서 부족한 만큼 채워 1L 가 되게 하면 된다.

고농도 용액을 희석해서 얼마를 만든다면 이것만 기억하면 된다.
1. 농도와 부피의 단위를 통일한다.
2. 이 식에 따라 만든다.
처음농도(C1)x처음부피(V1)=나중농도(C2)x나중부피(V2)
C, concentration; V, volume

1M 짜리로 100mM짜리 250mL을 만들려면,
C1: 1000 mM, V1:?
C2: 100mM, V2: 250mL
1000xV1=100x250
V1=(100x250)/1000=25
즉, 1M짜리 25mL 과 물 225mL을 섞어 250mL로 만들면 된다.
개구리DTer  |  07.19 19:18  
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