실험 Q&A Immunology > Immunoprecipitation
Co-IP, protein A bead 질문드립니다.
레벨1 BIOPIO (일반인)
안녕하세요.
Co-IP를 진행하고 있는데 protocol 중에 궁금한 점이 있어 질문 올립니다.
조금 바보같은 질문인데, 맨 마지막 과정에 elution 과정에서 bead를 떼어내기 위하여 sample buffer를 넣고 끓이는 과정이 있는데,
이 과정에서 bead는 떨어져 나가는 건가요 아니면 녹아 없어지는 건가요?
sample buffer를 넣고 끓임으로써 bead-antibody-Target protein 결합이 떨어지게 되어 antibody는 heavy와 light chain으로 잘리게 되고, target protein도 따로 떨어지는 것까지 이해가 되는데, bead가 어떻게 되는지 궁금합니다.
sepharose는 상표명으로, agarose와 같다고 들었습니다.
그렇다면 끓이는 과정 중에 녹아 없어지는 게 맞나요?
그리고 sample buffer를 넣고 안 끓이면 어떤 차이가 있는지도 궁금합니다.
그냥 떨어지는 정도의 차이만 존재하는 건가요?
답변 부탁드리겠습니다.
감사합니다.
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