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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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질문 cell counting 질문 있습니다 ㅠㅠ
알quddlsms(과기인)  |  07.18 16:42

cell counting에 대하여 질문이 있어서 글 남깁니다 ㅠㅠ 도움 부탁드립니다...

 

100pi 1개에 있는 cell을 cell counting을 할 때, 
 

trypsin 3ml에 media7ml 넣고 중화(①plate)한 다음에,

여기서 15ramda 를 따고 tryphan blue 15ramda따서 pipetting하고나서 

4칸을 셌을 때, 132개가 나왔다면 132*1/2*10^4(66*10^4) 이고,

 

100pi dish(②plate)하나당 2*10^6개의 cell을 깔려면

200*10^4 ÷ 66*10^4 = 3.03030303...... 이렇게 계산되고,

이 새로운 100pi dish(②plate)에 배지 7ml을 미리 주입하고나서,

 일반media를 7ml넣고, trypsin을 3ml 넣어서 중화한 상태의 cell(①plate)에서 3ml을 따서 ②plate에 넣어주면 되는거 맞나요?

#cell culture
 
#cell counting
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1. 15 + 15 해서 나온값은 결국 2배를 해줘야 맞는 계산입니다.

132*2*10^4/ml 농도로 셀을 가지고 있네요

그럼 132*2*10/ul 의 셀의 농도네요 (ul로 계산해 놓으면 편합니다.)

필요한 양이 2*10^6이 필요하니 이것을 132*2*10로 나누면 757ul가 필요하네요

새로운 디쉬에 배지를 넣어주고 셀 757ul를 넣어주시면 되네요

대왕개구리안재진  |  07.19 10:51  

윗 댓글 분이 답변을 잘못 주셨는데, 원글님 계산식이 맞습니다.

 

4개 구역이니 /4, 2배 dilution이니 x 2 해서 결국 1/2이구요.

 

글쓰신 내용이 맞는데 TE 넣으시고 바로 suction 후 세포 떨궈서 하베스트 하시던지, 센돌이 한 번 돌려서 fresh medium으로 바꿔서 하시던지 하세요.

ㅇㅇ  |  07.19 17:15   
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