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 전체 > Immunology > Immunofluorescence
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질문 면역염색법 할 때 antibody 관련 질문있습니다!
알도르르르(대학원생)  |  07.17 09:36

IF든 IHC든 만약 제가 염색하려는 조직이 mouse sample일때 사용하려는 primary, secondary Ab 모두 anti-mouse면 보고싶은 protein뿐만 아니라 전부 다 non-specific하게 염색이 될까요???

 

갑자기 궁금해져서 질문드립니다!

#IF
 
#IHC
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채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
1차는 anti mosue xx즉 xx는 mouse아무곳에 붙는것이아니라 마우스의 여러 부위증 특정곳에만 붙도록 설계됩니다. 예로 anti mouse OCT4라는 항체는 마우스의 많은 조직내 수많은 세포내 OCT4를 발현하는것에 달라 붙습니다. 이 1차 항체에만 달라붙는 2차항체를 붙여야하는데 2차항체가 anti mouse라면 1차항체를 무시하고 많은 마우스조직내 수많은 세포는 당연 모두 마우스세포이고 이세포가가지는 항원(antigen)에 다 달라붙겠죠? 즉 1차 문제가아니라 2차항체를 anti mouse을 사용하면 안됩니다. 2차항체는 1차항체의 오리진 항체를써야합니다. 예로 Rabbit에서 추출한 anti mouse OCT4가 1차면 2차는 anti rabbit을 사용해야 이론적으로 만저 붙인 1차항체에만 달라 붙습니다. 하지만 2차항체인 anti rabbit도 1차항체를 무시하고 그냥 mouse에딜라붙을 수도 있는데 2차항체 only로 염색하는 그룹도 있으면 좋겠습니다.
개구리Favorite  |  07.23 08:18  
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