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zebrafish embryo pronase 처리방법
레벨2 팔탄농부 (과기인)
제가 졸업논문 실험으로 zebrafish embryo를 이용해서 형태학적 점수 가이드라인을 보고 실험하고자 합니다.
대략적인 실험방법은 zfin에서 찾아서 진행중인데 방법이 맞는건지 해서 여쭙고자 합니다. 일단 처음으로 pronase를 처리하는 시간인데 저는 수정 후 2시간 후에 2mg/ml로 1분간 처리하고 있습니다. 이 후 washing하는 방법이 궁금해서 질문드립니다.
washing을 하다보면 pronase를 처리해서 dechorinate되는데, 저는 2~3번 washing 할때, 1차 증류수로 여러 plate를 옮기면서 점점 희석시키면서 washing 하고 있는데, 하다보면 마지막으로 배지에 옮기기 전에 dechorinate되는 embryo가 너무 많습니다. 혹시 dechorinate할 때 washing하는 방법이나 노하우가 있으시면 알려주시면 감사하겠습니다.
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