실험 Q&A Cell Biology > Differentiation/Proliferation
CCK-8 실험시 cell supernatant를 사용해도 될까요?
레벨1 깨비스콘 (대학원생)
안녕하세요
CCK-8 실험 프로토콜을 보던중 방법적인 측면에서 궁금한점이 생겨셔요.
프로토콜을 보면
1.세포분주 및 배양
2.다양한 농도의 compound 를 각 well에 처리
3.적정시간배양
4.cck 첨가
5.1~4시간후 450nm 에서 측정
이렇게 살아있는 세포가 있는 well에 cck-8첨가 하는 것으로 나와있는데요
제가 궁금한것은 3번단계후 supernatnat를 1.5ml tube에 옮긴뒤 -20도씨에서 보관후
96well plate에 다시 분주후 cck를 첨가해도 되는지에 대한 여부입니다.
제 프로토콜을 정리하자면..
1. 세포분주 및 배양(24well plate)
2.나양한 농도의 compound 첨가
3. 일정시간 배양
4. cell supernatant 수거, 냉동보관(-20℃)
5. cell supernatant 100ul을 96well plate에 옮긴후
6. cck 첨가
7. 1-4시간후 OD값 측정
이렇게 supernatant 수거후 96wellplate에 분주해서 실험해도 될까요?
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