실험 Q&A Cell Biology > Viability
B16F10 chemical 실험(도와주세요ㅜㅜ)
레벨1 듈리 (대학원생)
안녕하세요
지나가시는 길에 아시는 답변이면 꼭!! 부탁드립니다.
저는 실험초보에 실험실에 물어볼 사람이 없어 여기에 남깁니다. ㅜㅜ
( 정말 기본적인 질문이라 부끄럽지만 도와주세요)
먼저 저는 B16F10을 이용해 chemical 처리후
cell proliferation, cytotoxicity 확인하려고 합니다.
1. 96well에 100ul씩 DMEM으로 5000으로 seeding을 하였고,
chemical을 50.25.12.5,6.25uM.. 으로 10ul씩 처리하고
CCK-8을 10ul 처리해서 측정했는데 일정농도 이상부터
O.D값이 4 이상이 나왔습니다. ;;
cell이 많은건가요? 제가 농도처리 또는 용량을 잘못 한것인가요?
문제는 현재 저는 농도 용량을 만들어야하는 방식을 모르겠습니다ㅠㅠ
일반적으로 chemical 처리할때, 농도 50, 25, 12.5..uM의 농도일때
96 well 에 얼만큼씩 처리하시나요? (이 계산이 어렵습니다ㅠㅠ)
chemical의 mw.300정도입니다.
2. 또 문제는 chemical 100mM( Stock) 을 DMSO에 희석해서 사용해야하는데
DMSO 현재 99.9% 가 있는데 어떻게 희석해서 사용하는지 모르겠습니다.
정말 기본적이지만 물어볼 곳이 여기뿐이라 질문드립니다.
아시는 선배님들께서 꼭 답변 부탁드립니다.
감사합니다ㅜㅜ
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