실험 Q&A Immunology > ELISA
ELISA hIL-6_H292cell
레벨1 쓧쓔 (대학생)
ELISA hIL-6 진행중에 있습니다.
cell은 H292사용하고 있고 96well, 1X10^6cells/ml, 10%RPMI로 200ul seeding 후 O/N, 5%RPMI 100ul media change, 1h 후 sample 처리, 1h 후에 LPS 처리, 24시간 뒤에 sup harvest하였습니다.
sup으로 IL-6진행중에 LPS를 처리하지 않은 control군에서 IL-6가 발현되어 곤란합니다ㅠㅠㅠ
처음에는 희석배수가 잘못되었다고 생각해서 serial dilution하여 진행하여도 LPS처리군과 똑같이 발색되었습니다.
standard는 잘 발색되는 것 보니 coating이나 antibody처리 문제는 아닌거 같은데 다른 원인이 더 있을까요?
참고로 MCP-1도 진행중이지만 MCP-1은 전혀 발색이 되지 않습니다..ㅠ
BD kit 사용중입니다.
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