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질문 ihc/icc negative control human IgG
알moltox(과기인)  |  2019.06.28 10:20

제가 지금 breast cancer tissue와 breast cancer cell에 human igg를 negative control로 사용하고 있습니다. human igg가 facs(ihc와 동일한 antibody사용)에서는 binding 하지않는데 ihc에서는 binding이 너무 잘됩니다. 제 이론상으로는 아예 염색이 하나도 되지 않아야 하는데 이유가 무엇일까요?

제가 논문을 좀 찾아본 결과로 paraffin block을 만들면 조직이 소수성이 높아져 igg의 fc부분을 비특이적으로 결합을 시킨다고 알려져 있습니다.

이게 문제인건가요?
현재 개발하고 있는 antibody가 정확하게 붙었는지 확인 할려면 negative가 필요할 것 같은데 다른걸 써야하나요? 개발하고 있는 antibody가 mouse에서 생성한 antibody인데 그럼 ihc 할 때 mouse igg를 사용해서 비교해야하나요?

#ihc
 
#negative control
 
#human igg
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