실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
iNOS, COX-2 발현 확인 및 NO, PGE2 발현 확인
레벨1 sh1196 (과기인)
안녕하세요, 고수님들
너무 기초적인 것일 수도 있는 질문 하나 드릴게요ㅜㅜ
Raw264.7cell에서 LPS처리해서 iNOS, COX-2의 mRNA 발현을 확인했습니다.
그래서 단백질 실험으로 넘어가려고 하는데
주로 iNOS와 COX-2 항체로 western blot을 많이 보더라구요
여기서 궁금한게,
iNOS가 전사되어 NO가 생성되고, COX-2는 PGE2로 합성되는데
NO와 PGE2의 단백질 발현을 확인하지 않는 이유가 있나요?
제 생각으로는
NO는 기체 즉, 반감기가 짧아 확인 불가능해 NO assay를 통해 배지에 녹아있는 NO를 측정하는 방법으로 대체!
PGE2도 직접적으로 확인이 불가?
다른 cytokine(TNF-a, IL-6, IL-1b)는 western blot data가 있던데
NO와 PGE2는 어떤 이유로 확인이 안되는지 궁금합니다.
알려주시길 바랍니다~~
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