실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
MSCV promoter를 쓰는 vector의 start codon 찾는 법 좀 봐주세요.
레벨2 연연 (대학원생)
안녕하세요. 실험실에서 홀로 클로닝을 하고 있어서 기본적인 부분을 찾는것도 쉽지가 않네요. 제가 MSCV promoter를 사용하는 vector에 ORF를 cloning 하려고 하는데요. gag 바로 앞에 gene을 넣으려고 합니다. 그런제 첨부된 사진을 보면 ATG가 kozak sequence앞부분에 하나더 있는데요. 이게 혹시 나중에 문제가 되지 않을까 궁금합니다. 아무리 뒤에 kozak이 있어도 앞에 ATG가 있으면 gene 발현에 문제가 되지 않나요? 확인해보니 앞의 ATG와 frame도 맞지 않더라구요. 이런 vector를 사용하신 분 있으시면 조언좀 부탁드리겠습니다.
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