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 전체 > Molecular Biology-Protein > Pull-down Assays
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질문 단백질 정량법 질문좀 드립니다..
알pdjj31(대학생)  |  06.24 00:33

안녕하세요.. 웨스턴 블랏을 이제 막 배우고 있습니다..

실험실에서 선배들 하는거를 옆에서 지켜보며 노트에 좀 끄적여 놓고 복습을 하다 궁금한 점이 있어 질문 드려요,,!

일단 예를들어 1번~5번 샘플이 있구 컨트롤+사고 방지로 bio rad50+dw950 해서 1ml 7개를 만듭니다..

일단 여기서 첫번째 질문은

control에는 물론 실험실 마다 다르겠지만 biorad+dw에 무엇을 넣어주나요..?

그리고 두번째 질문

spectrophotometer 595nm로 쬐어주면 od값이 나오는데..

od 값으로 10마이크로리터 일때, 20마이크로리터 일 때 값을 샘플마다 구합니다... 혹시 이 값은 무엇을 나타내고 어떻게 구하는지 알 수 있을까요?

그리고 이 정량 법을 bradford 라고 하는 방법이 맞나요? 제가 찾아봤을 때에는 BSA라는 시약으로 희석을 하는 거 같은데.. 저희 랩실에서는 BSA를 사용하지 않는 것 같아서요,,

#westernblot
 
#proteinassay
 
#단백질정량
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

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옆에 선배들이 계신데 굳이 이곳에서 질문을... 아마 선배들이 더 답변을 잘 설명해 주실거에요...  그리고 메뉴얼 링크를 드립니다. 참고하시면 됩니다.

그리고 마지막으로 단백질 정량은 상대적인 양을 비교하는 것입니다. 그 대조군으로 BSA라는 단백질이 안정하고 가격도 싸기 때문에 이용을 합니다. BSA 등 단백질로 농도별 추세선을 그려놓고 내 단백질이 어느 정도 농도인지 찾아가는 실험이라 랩엣 BSA를 안쓰신다면 정제된 항체나 다른 비교군 단백질을 이용할것입니다. 또 그게 아니라면 정량을 해서 샘플간 동량을 맞춰주는 실험이 될것입니다. 이때는 농도가 얼마다는것은 알수가 없겠죠

금개구리안재진  |  06.24 09:55  
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